Hijo del actor Alan Ackles, tiene dos hermanos, Joshua y Mackenzie.
Se graduó en la LV Berkner High School de Richardson (Texas), en 1996.
Se había planteado estudiar medicina deportiva, pero decidió finalmente trasladarse a Los Ángeles y probar suerte como actor.
Empezó en 1996, haciendo pequeños papeles en televisión. Un año después se unió a la serie “Days of our lives”, interpretando el papel de Eric Brady, y consiguió tres nominaciones en los Emmy.
Después aparecería en muchos de los capítulos de la sexta temporada de “Dawson´s Creek” (haciendo de CJ) y en la segunda temporada de “Dark Angel” (como Alec).
En 2001 intervino en “Blonde”, un film televisivo sobre la vida de Marilyn Monroe.
Ese mismo año fue candidato para el papel de Clark Kent en “Smallville”, pero aunque el papel no fue para él, aparecería en la serie interpretando a otro personaje.
Su primer papel protagonista lo logró en 2005, en “Sobrenatural”, donde da vida a Dean Winchester.
Ha hecho también algunos trabajos para el cine, como “Ten Inch Hero” (2007) o “Devour” (2005), donde coincidió con su padre.
En septiembre de 2006 se casó con Stephanie Ware.
Le gusta la equitación y la fotografía, también cantar y tocar la guitarra.
Una curiosidad: a los cuatro años fue modelo infantil.
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